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                                家恩医疗体系

                                【ZHUANJIAJIEXI】RANSETIJIANCEFENLEI

                                • 本文作者:advert-art.com
                                • 本文来源:北京家恩德运医院

                                地球上的一切生命现象都由遗传密码控制。生物进化、物种繁衍、民族与族系的传代、个体生殖都是遗传物质的复制、改造和对环境的适应达到平衡的过程。个体遗传物质在复制过程中发生过度变异,便可导致疾病或失去繁殖能力。

                                真核细胞在进行分裂传代的过程中,将其遗传物质包装成结构严谨的染色体以保证一分为二过程中的时效性、均等性和安全性。细胞完成遗传物质复制和包装后进入细胞周期的中期也就是染色体向两个子细胞均匀分配阶段,哺乳动物细胞通常在30分钟之内完成这个过程(图1)。这个短暂的窗口给了我们识别和比较每个个体遗传物质形态和数量的完整性的机会。

                                1.1.png

                                图1.人类细胞的有丝分裂实时动态过程,红色荧光蛋白标记染色体,绿色荧光蛋白标记纺锤体。引自Dick and Gerlich . Nat Cell Biol. 2013 ; 15(11): 1370.

                                我们的实验室工作人员可以让细胞分裂过程中的染色体停止运动,然后将染色体均匀分散开,经过染色得到可以比较分析的染色体图像(图2)。制备的染色体越长,经染色看到的条带就越多,漏诊率和误诊率也就越低。我们实验室经过长期优化实验流程和方法,可以保证一年四季完成550G、700G到850G以上的染色体制备。我们常规采用550G-700G国际标准,高于700G标准需要申请说明。320G、550G、700G和850G显带分别相当于10Mbp、5 Mbp、4Mbp和2-3Mbp的分辨率。

                                1.2.png

                                图2. 经吉姆萨染色的M期染色体图像。

                                 

                                1.不育不孕

                                临床适应症:

                                l 男性不育

                                l 女性不孕

                                l 反复流产

                                l 不良孕史

                                取材:

                                l 夫妻双方外周血


                                样本要求:

                                类型

                                採血量

                                抗凝要求

                                报告周期

                                寄送要求

                                外周血

                                3-5 ml

                                肝素钠/锂,绿帽管

                                5-7天,可加急

                                常温1-2天内送达


                                不育不孕症染色体分析诊断标准及优缺点:

                                不育不孕染色体分析标准采用550-700G显带标准,如有>850G分辨率要求,请在申请单上注明。高分辨率检查可以减少误诊和漏诊率。常规细胞遗传学分析可以检测染色体数目和结构的平衡异常异常,是检查染色体易位、倒位、断裂和动力学等染色体稳定性的可靠甚至技术手段。但检测<5Mbp的DNA微缺失和微重复,需结合PCR技术、FISH技术、CMA技术和DNA测序技术。分子诊断技术可以快速甚至在一天之内完成所有染色体及其片段的拷贝数检测。


                                满足诊断要求的550G核型图

                                1.3.png


                                2.先天性遗传病

                                临床适应症:

                                l 出生缺陷,器官发育障碍

                                l 迟发性器官功能障碍,包括神经肌肉、肢体、内脏、眼和耳等。

                                l 先天性智力障碍

                                l 迟发性智力障碍

                                取材:

                                l 外周血或其它组织


                                样本要求:

                                人群

                                类型

                                採血量,抗凝要求

                                报告周期

                                寄送要求

                                成人

                                外周血

                                3-5 ml,肝素钠/锂,绿帽管

                                5-7天

                                常温1-2天内送达

                                婴儿

                                外周血

                                >0.5 ml,肝素钠/锂,绿帽管

                                5-7天

                                常温1-2天内送达


                                各种组织

                                >5 mm3,严格无菌,普通试管

                                15天

                                4-8oC冷藏,1-2天内送达


                                遗传病染色体分析诊断标准及优缺点:

                                遗传病染色体分析采用>700G高分辨标准。高分辨率检查可以减少误诊和漏诊率。常规染色体分析是检测染色体数目和结构异常的金标准,是检测染色体平衡异常的可靠方法,是检查染色体易位、倒位、断裂和动力学等染色体稳定性的不可替代技术。但检测不到<3Mbp的DNA微缺失和微重复。


                                满足诊断要求的质量控制700G核型图

                                700g.png

                                3.产前检查

                                临床适应症:

                                l 高龄产妇

                                l 不良孕史,如怀过染色体异常的孩子

                                l 超声异常

                                l 孕妇血清检查异常

                                l 胎儿死亡

                                产前染色体诊断样本:

                                l 羊水

                                l 绒毛


                                样本要求:

                                类型

                                取材量

                                抗凝要求

                                报告周期

                                寄送要求

                                羊水

                                10 ml

                                EDTA管,紫帽

                                2 周

                                冷藏,1天内送达

                                绒毛

                                >5 mm3

                                严格无菌,紫帽试管

                                2周

                                冷藏,1天内送达

                                死胎

                                多种组织

                                严格无菌,紫帽试管

                                2周

                                冷藏,1天内送达


                                产前染色体分析诊断标准及优缺点:

                                产前染色体分析标准采用550G显带。常规细胞遗传学分析可以检测染色体数目和结构的平衡异常异常,是检查染色体易位、倒位、断裂和动力学等染色体稳定性的可靠甚至技术手段。但检测<5Mbp的DNA微缺失和微重复,需结合PCR技术、FISH技术、CMA技术和DNA测序技术。分子诊断技术可以快速甚至在一天之内完成所有染色体及其片段的拷贝数检测。

                                诊断标准图:550G核型图


                                4.新生儿

                                需要做染色体分析的临床适应症:

                                l 怀疑非整倍体(13 三体综合征,18 三体综合征、 21-三体或唐氏综合征,特纳综合征,克氏综合征)患者

                                l 有外观特征表型,比如肢体畸形、五官畸形、生殖器官发育障碍

                                l 有内脏畸形

                                l 有染色体结构重排的家族史

                                新生儿染色体诊断样本:

                                l 脐带血

                                l 外周血

                                l 脚跟血


                                样本要求:

                                人群

                                类型

                                採血量,抗凝要求

                                报告周期

                                寄送要求

                                新生儿

                                脐带血

                                1 ml,肝素钠/锂,绿帽管

                                5-7天

                                常温1天内送达

                                新生儿

                                脚跟血

                                >2滴,肝素钠/锂,绿帽管,严格皮肤消毒无菌操作

                                5-7天

                                常温1天内送达


                                新生儿染色体分析诊断标准及优缺点:

                                新生儿染色体分析标准采用850G显带。高分辨率检查可以减少误诊和漏诊率。常规细胞遗传学分析可以检测染色体数目和结构的平衡异常异常,是检查染色体易位、倒位、断裂和动力学等染色体稳定性的可靠甚至技术手段。但检测<5Mbp的DNA微缺失和微重复,需结合PCR技术、FISH技术、CMA技术和DNA测序技术。分子诊断技术可以快速甚至在一天之内完成所有染色体及其片段的拷贝数检测。诊断标准图:850G核型图

                                850G.png


                                5.白血病

                                需要做染色体分析的临床适应症:

                                l 骨髓增生异常综合征(MDS)

                                l 各种类型白血病

                                l 家族中其他人患有白血病

                                l 淋巴瘤及淋巴组织异常增生

                                l 贫血及其它血液病

                                l 骨髓纤维化

                                l 遗传性球形细胞增多症

                                白血病染色体诊断样本:

                                l 骨髓

                                l 外周血

                                l 淋巴瘤活检组织


                                样本要求:

                                组织类型

                                採血量,抗凝要求

                                报告周期/加急

                                寄送要求

                                骨髓

                                2 ml,肝素钠/锂,绿帽管

                                5天/3天

                                常温1天内送达

                                外周血

                                >2 ml,肝素钠/锂,绿帽管,

                                5天/3天

                                常温1天内送达

                                活检组织

                                >5mm3, 紫帽管

                                5-7天

                                冷藏,1天内送达


                                白血病染色体分析诊断标准及优缺点:

                                白血病患者染色体分析标准400G显带以上,分辨率越高对病情的诊断越有帮助,可以减少昂贵的FISH检查使用。常规染色体分析可以检测染色体数目和结构的异常,对白血病诊断分型、临床用药、预后判断和复发随访有明确的指导意义。结合分子诊断技术进一步检测染色体基因的微缺失、微重复、基因扩增和融合基因,可以进一步指导临床进行个性化治疗。

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                                6.实体肿瘤

                                需要做染色体分析的临床适应症:

                                l 肿瘤患者

                                l 癌前病变患者

                                l 职业性肿瘤易患人群(接触物理性和化学性致癌物)

                                l 家族性癌症高危人群

                                l 遗传性癌症高危人群

                                实体肿瘤染色体诊断样本:

                                l 新鲜手术肿瘤组织

                                l 肿瘤穿刺活检组织

                                l 肿瘤性胸水、腹水和积液

                                l 血液内循环肿瘤细胞(CTC)

                                l 外周血(职业性、家族性和遗传性癌症高危人群)

                                XIANGGUANYUEDU

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